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恒远产品文献:醛固酮,血管紧张素 II,血栓素 B2试剂盒

点击次数:62 发布时间:2019/9/6
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济脉通片对长期饮酒大鼠血压及相关活性物质的影响
陈素红 1*,刘小胖 1,苏敏霞 1,夏超群 1,苏 洁 2,吕圭源 1, 2
1. 温州医科大学,浙江 温州 325035 2. 浙江中医药大学,浙江 杭州 310053 


摘 要:目的 观察降压中药济脉通片对长期饮酒大鼠的血压、肝肾功能及血管活性物质的影响。方法 SD 大鼠 40 只,随机分为对照组、模型组、济脉通片组、氨氯地平组,每组 10 只,雌雄各半。大鼠自由饮用白酒,乙醇体积分数梯度递增,造模 4周后开始 ig 给药,每天 1 次,连续给药 49 周。定期监测大鼠收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP),检测血生化指标。末次给药后,大鼠下腔静脉丛取血,依次测血浆血管紧张素 II(Ang II)、醛固酮(ALD)、血栓素 B2(TXB2)水平。
结果 连续饮酒 12 周,模型大鼠的血压(SBP、DBP、MBP)升高,直至饮酒 53 周仍稳定;济脉通片给药 15 周起,明显降低长期饮酒模型大鼠的血压(SBP、DBP、MBP),长达 49 周的给药期间显示其降压效果稳定(P<0.05、0.01)。济脉通片给药第38~48 周,能不同程度降低饮酒模型大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)量(P<0.05、0.01)。济脉通片给药 49 周能够降低饮酒模型大鼠血浆 ALD、Ang II、TXB2的量(P<0.05、0.01)。结论 济脉通片对长期饮酒致高血压模型大鼠有良好的降压作用,对大鼠肝损伤具有改善作用,其降压机制可能与肾素-血管紧张素-醛固酮系统、血栓素水平有关。
关键词:济脉通片;高血压;肝功能;肾素-血管紧张素-醛固酮系统;血栓素
中图分类号:R285.5 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2014)09 - 1278 - 06 

高血压是常见的心血管病。随着生活水平的提高,饮酒、吸烟、高盐、高糖、高脂饮食以及长期处于高度紧张状态下等不良生活习惯而导致高血压的人数也越来越多。有报道酒精摄入量≥20 g/d 是高血压的独立危险因素,饮酒量与血压水平呈正相关[1],长期大量饮酒能导致高血压。模拟饮酒等人类不良生活方式,建立接近人类病症的高血压动物模型具有现实意义。本课题组前期研究已报道了高糖高脂喂养[2]、高嘌呤饮食[3]、长期饮酒[4]可引起大鼠血压升高及相关指标异常,建立了多种不良生活方式诱导的高血压动物模型。
济脉通片是由夏枯草、野菊花、决明子 3 味中药制成的复方制剂,具有清肝泻火之功效,用于肝火亢盛型高血压的治疗,2007 年获得国家食品药品监督管理局颁发的临床批件,2011 年获得国家科技部重大新药创制专项资助开展临床研究。本实验室前期研究结果表明,济脉通片能明显降低自发性高血压(SHR)大鼠和肾性高血压(RHR)大鼠的血压[5-6];降低高血压伴高尿酸血症模型大鼠血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,其降尿酸机制可能与抑制黄嘌呤氧化酶(XOD)和腺苷脱氨酶(ADA)活性有关[7]。济脉通片与硝苯地平联用对老年自发性高血压大鼠起协同降压作用,降压机制可能与升高血浆降钙素基因相关肽(CGRP)、血清 NO 量等有关[8]。鉴于济脉通片对多种高血压模型的良好改善作用,长期过量饮酒又是常见的不良生活方式之一,故本实验在前期研究的基础上,采用长期饮酒致高血压大鼠模型,观察济脉通片对饮酒模型动物的血压、肝肾功能以及血管活性指标的影响,为济脉通片的临床用药提供参考。
1 材料
1.1 动物
SD 大鼠,50 只,雌雄各半,体质量 180~220 g,浙江省实验动物中心提供,许可证号 SCXK(浙)
2008-0033。
1.2 药物与试剂
济脉通片,批号 20111201,0.465 g/片(含熊果酸1.526 mg/片),浙江远力健药业有限责任公司;苯磺酸氨氯地平片,批号 1205013,辉瑞制药有限公司;戊ba比妥钠,批号 WS20120112,德国分装,上海西唐试剂公司;肝素钠,批号 101217,江苏常州千红生化制药股份有限公司。丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、UA,均由宁波美康生物科技股份有限公司提供;Cr,上海复星长征医学科学有限公司。醛固酮(ALD)、血管紧张素 II(Ang II)ELISA 试剂盒、血栓素 B2(TXB2)ELISA 试剂盒,均由上海恒远生物科技有限公司提供。红星二锅头酒(清香型白酒,酒精度 52%),2.5 L/瓶,北京红星股份有限公司。
1.3 仪器ALC-NIBP 无创血压测量分析系统,上海奥尔科特生物科技有限公司;TBA40—FR 型全自动生化分析仪,东芝医疗系统株式会社;Powerwave340酶标仪,美国 Bio-TEK 公司;DDL—5 低速冷冻多管离心机,上海安亭科学仪器厂。
2 方法
2.1 分组、造模及给药
SD 大鼠,40 只,雌雄各半,随机分为 4 组,即对照组、模型组(给予等体积蒸馏水),济脉通片
组(418 mg/kg,相当于临床人用等效剂量)、氨氯地平组(1 mg/kg);除对照组外,各组大鼠在正常饲料喂养的基础上,用蒸馏水稀释白酒,给予体积分数为 5%的白酒,大鼠自由饮用,于 59 d 内体积分数递增至 22%,从饮用 22%白酒开始,持续饮用。于造模 4 周后,按 10 mL/kg 剂量每天 ig 给药 1 次,连续给药 49 周(即持续造模 53 周)。
2.2 指标检测
2.2.1 血压 采用ALC-NIBP无创伤血压测量分析系统检测各组大鼠血压。测压前先打开预热器加热,保证室内温度保持在 25~30 ℃。检测并确认各通道的气密性是否正常,将大鼠装入适宜的装有恒温调节系统的鼠笼(27~30 ℃),鼠尾穿过器孔固定,连接脉搏传感器,测量清醒状态下大鼠收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP)。分别于给药第 0、2、5、8、12、15、21、26、32、36、41、45、49 周,观察大鼠血压 SBP、DBP、MBP(1 mmHg=0.133 kPa)的变化。
2.2.2 血生化指标 于造模 42 周(给药 38 周)后,禁食 12 h,眼底静脉丛取血 2 mL,室温静置 2 h 后,3 500 r/min 离心 10 min,取上清。使用 TBA40—FR型全自动生化分析仪,采用连续监测法测定 ALT、AST;酶比色法测定 UA、ku味酸法测定 Cr 水平。
2.2.3 体内活性物质 末次给药后禁食不禁水 12 h,用 3%戊ba比妥钠(2 mL/kg)ip 麻醉,下腔静脉丛取血,将 0.5 mL 血加入已加肝素钠(1 500 U/mL)的抗凝管中,3 500 r/min 离心 10 min 分离血浆,按 ELISA试剂盒要求检测血浆 Ang II、ALD、TXB2水平。

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